嬰幼兒配方奶粉中核苷酸含量測(cè)定
嬰幼兒奶粉中核苷酸的檢測(cè)
樣品制備：
精密稱取奶粉 5.0 g，加適量溫水，超聲 10 min 使溶解，加 10%醋酸溶液 5 mL，搖勻，靜置，再加水定容至 50 mL，搖勻，過濾，取上清液待用。
樣品凈化：
SPE 小柱：Polyclean X-HLB 60mg/3mL（貨號(hào)：9B-P001-06030）
活化：甲醇 3 mL
平衡：水 3 mL
上樣：2 mL 待凈化液
沖洗：20%甲醇/水溶液 3 mL
合并上樣流出液與沖洗流出液，再加水定容至 5 mL，作為待測(cè)溶液。
HPLC 測(cè)定：
色譜柱：Titank C18 5μm 250×4.6mm （貨號(hào)： FMG-5560-EONU）
流動(dòng)相：0.1 M K2HPO4 溶液（用磷酸調(diào)節(jié) pH 值至 5.6）為流動(dòng)相A；乙腈為流動(dòng)相B
流 速 ：1 mL/min
進(jìn)樣體積：5 μL
檢測(cè)波長(zhǎng)：260 nm
溫度：常溫
梯度：
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時(shí)間(分鐘) |
流動(dòng)相 A(%) |
流動(dòng)相 B(%) |
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0 |
100 |
0 |
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8 |
100 |
0 |
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25 |
95 |
5 |
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27 |
75 |
25 |
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40 |
75 |
25 |
5 種核苷酸混標(biāo)圖譜
Polyclean X-HLB 凈化后嬰兒配方奶粉圖譜
