食品中三聚氰胺檢測的固相萃取方法
（Polyclean X-MCX）
一、實驗目的
本研究利用固相萃取法作為樣品的前處理方法，HPLC 法作為檢測手段。該方法可簡化樣品的前處理過程，節(jié)省有機溶劑的使用，操作簡便。
二、實驗目標物
三聚氰胺 (CAS: 108-78-1)
三、應用范圍
本方法適用于食品中三聚氰胺的 HPLC 檢測及確證。四、參考標準
推薦性國家標準《GBT 22388-2008 原料乳與乳制品中三聚氰胺檢測方法》五、實驗材料
NuAnalytical Polyclean X-MCX 固相萃取柱 3mL/60mg。六、實驗方法
1、樣品提取
稱取 2.0ｇ試樣（精確至 0.001ｇ）于 50mL 離心管中，加入 15ｍＬ 1%三氯乙酸溶液和
5mL 乙腈，超聲提取 10min，再震蕩提取 10min，以不低于 4000r/min 離心 10min。上清液經三氯乙酸溶液潤濕的濾紙過濾后，用三濾乙酸溶液定溶至 25Ml,移取 5mL 濾液，加入 5mL 水混勻后做帶凈化液。
2、SPE 柱活化
使用前依次用 3mL 甲醇、5mL 水活化柱子。
3、上樣和洗脫
將 2 中的待凈化液轉移至固相萃取柱中。依次用 3mL 水、3mL 甲醇洗滌，抽至近干后， 用 6mL 5%氨化甲醇溶液洗脫。整個固相萃取過程流速不超過 1mL/min。
4、重新溶解
洗脫液于 50 度下用氮氣吹干，殘留物用 1mL 流動相定溶，渦旋混合 1min，過微孔濾膜后，供 HPLC 測定。
5、HPLC 條件
色譜柱：SuperLu C18 (250×4.6mm，5μm)
檢測器：UV@240 nm
流動相： A-離子對試劑緩沖液（準確稱取 2.10g 檸檬酸和 2.16g 辛烷磺酸鈉，加入約
980mL 水溶解，調節(jié)PH 至 3.0 后，定溶至 1L 備用） B-乙腈
洗脫方式：等度洗脫，A:B=80 : 20
柱溫：室溫 進樣體積:20 μL
七、實驗結果
1、牛奶基質中添加三聚氰胺 5mg/kg 的添加回收結果
表 1 5mg/kg 牛奶基質中三聚氰胺的添加回收結果
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回收率（%） |
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名稱 |
平均回收率（%） |
RSD(%) |
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1 |
2 |
3 |
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三聚氰胺 |
97.3 |
102.84 |
97.98 |
99.37 |
3.04 |
2、空白樣品添加 5mg/kg 的三聚氰胺殘留物色譜圖
